产品简介：
本产品在经典配方的基础上进行升级，用于细胞或组织总RNA 抽提的试剂。TRI Reagent 能很好提取动物细胞或组织及细菌的总 RNA，但对植物组织 RNA 的提取有选择性。模式植 物(拟南芥， 小麦，烟草，玉米， 大豆) 能提取较好的 RNA。一些多糖多酚含量高的植物 (西红柿， 银杏，梧桐， 毛白杨，棉花等)叶片使用TRI Reagent 不能提取 RNA。
TRI Reagent 可以抽提长达 15 kb 的 RNA，也可以抽提 microRNA 等小 RNA ，抽提小RNA 时宜-70℃沉淀过夜。
TRI Reagent 抽提所得 RNA 无 DNA 和蛋白污染。 每一百万细胞约可得 5- 15µg RNA； 每毫克组织约可得 1- 10µg RNA ，产量因细胞和组织不同而异。
TRI Reagent 抽提所得 RNA 可直接用于 Northern，点杂交，纯化 mRNA ，体外翻译， RNase protein assay ，cDNA 克隆以及 RT-PCR ，也可用于基因表达芯片分析，高通量测序等 对 RNA 质量较高的情况。
使用方法：
1、细胞裂解或组织匀浆。
(1) 贴壁细胞：吸尽培养液， 每 10cm2 细胞加入 1ml TRI Reagent。一般 6 孔板每孔加1ml ，12 孔板每孔加 0.5ml，晃动 3-5 下， 再用枪吹打 2-3 下， 确保全部裂解，然后吸至离心 管中。
(2) 悬浮细胞：离心收集细胞， 吸尽液体，每五百万至一千万动植物或酵母细胞或一 千万细菌，加入 1ml TRI Reagent。用枪吹打或适当 vortex，确保全部裂解。某些酵母和细菌 如裂解不充分， 可用匀浆器匀浆，确保全部裂解。
(3) 组织
1) 植物组织：植物叶片直接放入研钵中，加入少量液氮，迅速研磨成粉末，每 50- 100mg 植物叶片加入 1ml TRI Reagent。
注： 经典模式植物如拟南芥、烟草、小麦、玉米等植物叶片能很好地提取 RNA；但一些多糖多酚植物，如西红柿、 棉花、毛白杨等，不能使用 TRI Reagent 提取 RNA。
2) 动物组织： 按 10-30mg 组织加入 1ml TRI Reagent，用电动匀浆器或者一次性研磨 杵充分匀浆。
2、对于某些蛋白，多糖或脂含量很高的细胞或组织，TRI Reagent 裂解后可能会有不溶物或油脂状漂浮物。需 12,000g ，4℃离心 10 分钟， 然后吸取澄清的裂解产物至一新的离心 管中。
3、室温放置 5 分钟，使样品充分裂解。
4、每毫升 TRI Reagent 加 0.2ml 氯\仿，vortex 混匀或猛烈晃动 15 秒，室温放置 2-3 分 钟。
5 、12,000g，4℃离心 15 分钟， 然后吸取含总 RNA 的上层无色水相至一新的离心管中， 每毫升 TRI Reagent 约可吸取 0.5-0.55ml。
6、加入与上清等体积的冰冷异丙醇， 颠倒数次混匀，室温沉淀 10 分钟。如果希望提取 microRNA 等小 RNA，推荐-70℃沉淀过夜。
7 、12,000g ，4℃离心 10 分钟， 在管底可见 RNA 沉淀，弃上清。
8、每毫升最初的 TRI Reagent 加入 1ml 75%乙醇 (DEPC 水配制)，vortex 或颠倒混匀，
9 、7,500g 4℃离心 5 分钟，弃上清。再用离心机甩一下(>5,000rpm, 离心 1 秒)，小心 吸尽液体。
10、待 RNA 晾干后，加入 20-50 ul DEPC 水溶解， -70℃冻存。注意： 切勿让 RNA 过 分干燥，否则将极难溶解，且测出的 A260/280 值会低于 1.6。
注意事项：
1 、需自备氯\仿，异丙醇，DEPC 水，75%乙醇 (DEPC 水配制)。
2、所有离心管，枪头及相关溶液都必须无 RNA 酶污染。耐高温器物可 150℃烘烤 4 小 时以去除 RNA 酶， 其它器物去除 RNA 酶可考虑用 0.01%的 DEPC 水浸泡过夜， 然后灭菌， 烘干。溶液需用 DEPC 水配制。
3、使用冻存的细胞或组织抽提总 RNA 的效果通常比新鲜的细胞或组织差一些。因为 在细胞或组织冻融过程中一些细胞或组织内的 RNase 会被释放出来并剪切样品。如果不能 及时抽提 RNA，推荐先加入适量 TRI Reagent，并裂解样品后冻存。
4、必须戴一次性手套操作，且尽量不要对着 RNA 样品说话，以防 RNA 酶污染。
5、TRI Reagent 含有毒物质苯\酚，避免接触皮肤或吸入。为防止溅入眼睛，请戴防护眼 镜或使用透明保护屏。如皮肤接触 TRI Reagent，请立即用大量去垢剂和水冲洗，如仍有不 适，请听取医生意见。
6 、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存方法：
4℃保存，一年有效。
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产品编号 |
名称 |
包装 |
品牌 |
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R0016 |
Trizol (总RNA抽提试剂) |
100mL |
碧云天 |
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Q0600 |
Trizol总RNA提取试剂 |
100mL |
麦格 |
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