注意事项：
1. 本试剂盒实验流程中的所有水试剂均用DEPC水配制；
2. 取新鲜标本做冰冻切片前一定要用DEPC水配制的10%蔗糖溶液在4℃冰箱中浸泡过夜，再换用DEPC水配制的30%蔗糖溶液在4℃冰箱中浸泡过夜.然后-80℃冰箱保存或者直接冰冻切片。
3. 由于特定的mRNA序列仅占总序列的极少数，因此原位杂交容易出现非特异性染色，一般通过用不加探针或阴性标本作阴性对照，基本可以确定是否是非特异性染色。如果有明显的非特异性染色现象，可以用预杂交液稀释探针（一般稀释10倍就行），并应加强探针杂交后的洗涤。如果染色部位有出入，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。
4. 本试剂盒虽然操作步骤多,繁琐.但是背景干净,非特异染色少!是SCI文章通用的经典方法.可以适用长链的cRNA探针.
