细胞培养板的选择和使用
细胞培养板是一种用于细胞培养的实验室用品。由一个塑料制成的圆形或方形培养基底和一个可密封的盖子组成。培养基底通常具有多个孔或凹槽,用于容纳细胞培养物。材料:通常采用无细胞毒的高质量聚苯乙/烯材料制成,具有良好的耐热性和耐化学药品的性能。
细胞培养板作为培养细胞的一种常用和重要的工具,形状、规格、用途多样。
细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底(U型和V型);培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384孔等;根据材质的不同有Terasaki板和普通细胞培养板。具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。
一、细胞培养板的选择
1)细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底(U型和V型);
2)培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384孔等;
3)根据材质的不同有Terasaki板和普通细胞培养板。具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。
孔数的选择
细胞培养板的孔数包含6孔、12孔、24孔、48孔、96孔和384孔。不同孔数的培养板能培养的细胞数量不同最终的应用场景也会不同。如何选择孔数主要根据实验所需的通量水平以及具体的实验要求来决定。例如WB、流式检测相关实验,需要较多的细胞样本量,最终的检测通量较低,一般会选择6孔板、24孔板;又如CTG实验、CCK8实验、MTT实验,实验通量较高,最终的检测手段可以实现自动化,多数可以选择96孔板或者384孔板。
表面处理方式的选择
细胞培养板的处理方式主要有TC处理和超低吸附处理。选择哪种表面处理方式,主要取决于培养的细胞是贴壁细胞还是悬浮细胞。细胞培养板一般采用的原材料是聚苯乙/烯,这一材料具有疏水性。对于贴壁细胞而言,需要贴附在亲水表面侧能生长。经过TC处理的细胞培养板,表面改性后更适合贴壁细胞的培养。超低吸附处理是将特殊的两性分子聚合物镀膜至培养板表层,可有效抑制细胞附着,从而满足悬浮细胞培养的需求。因此对于贴壁细胞可选择TC处理细胞培养板,对于悬浮细胞可选择超低吸附处理细胞培养板或者未经任何处理的细胞培养板。
细胞培养板颜色的选择
细胞培养板的颜色与应用息息相关。细胞培养板的颜色主要有透明、白色、黑色。如果用相差显微镜或肉眼观察细胞,可选择透明的细胞培养板。对于可见光光谱以外的应用(如冷光或荧光),就必须使用有颜色的细胞培养板(如白色或黑色)的。在使用从顶部读数的仪器时,底部应该是不透明的,而使用显微镜或底部读数的仪器时,应选择底部透明的培养板。冷光样品通常选择白色表面,以便最大限度提高信号的反射率,而大于300nm的荧光应用时通常使用黑色表面,以吸收激发信号。同时有颜色的表面还可以防止相邻孔之间的信号串扰。具体应用所采用的不同颜色培养板总结如下:
1)发光检测(冷光)一白色细胞培养板,以便最大限度提高信号的反射率;
2)荧光检测(荧光)一黑色细胞培养板,以吸收激发信号,可以防止相邻孔之间的信号串扰;
3)顶部读数一底部不透明的细胞培养板。
显微镜或底部读数一底部透明的细胞培养板。
二、平底和圆底(U型和V型)培养板的区别和选择
1)贴壁细胞一般用平底培养板。
2)悬浮型细胞的培养一般用V型。
3)U型培养板亦多用于培养悬浮型细胞 。
4)V型培养板有时用做免疫学血凝集的实验。
Terasaki板和普通细胞培养板的区别
Terasaki plate主要是用于晶体学研究,产品设计便于对晶体的观察与结构分析。有两种sitting 和handing drop两种方法,两种方法应用产品的外形结构也不同。材料上选择crystal class polymer ,特殊的材料有利观察晶体结构。
细胞培养板主要是PS材料,材料是treated sufface,便于细胞贴壁生长与伸展。当然还有浮游细胞的生长材料,同时还有low binding surface
细胞培养板与酶标板的区别
酶标板一般要比细胞培养板贵,细胞板主要做细胞培养,也可以用来测蛋白浓度;酶标板包括包被板和反应板,一般不用做细胞培养,它主要做免疫酶联反应后的蛋白检测,需要更高的要求和特定的酶标工作液。
常用不同培养板的孔底面积及推荐加液量
不同孔板所加培养液的液面都不宜太深,一般在2~3mm范围,结合不同孔的底面积就可算出各培养孔的适宜加液量。若加液量过多会影响气体(氧气)交换,而且在搬动过程中易溢出造成污染。具体所加细胞密度依实验的目的不同灵活掌握。
细胞培养板使用注意事项:
无菌操作:在使用细胞培养板前,必须进行严格的无菌操作,以防止细菌和其他污染物的污染。
培养基选择:根据不同的细胞类型和实验需求选择适合的培养基和添加物。
注意培养条件:在培养细胞时,需要注意适宜的温度、湿度和气体条件,以促进细胞的正常生长和增殖。
观察和记录:定期观察和记录细胞的生长情况、形态和其他相关参数,以评估细胞培养的效果和结果。
培养板一般为一次性使用,尤其在接触了有毒、有害等物质后更应该处理后丢弃。但如果要反复使用则一定要进行正确的清洗和消毒,以保证细胞培养的效果。
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