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发布日期:2023/9/11 9:59:00

如何选择包埋剂?可分为哪几类?

OCT包埋剂英文全称:optimal cutting temperature compound,是一种polyethylene glycol和Polyvinyl alcohol的水溶性混合物,已广泛用于免疫组化实验室中,其用途是在冰冻切片时支撑组织,以增加组织的连续性,减少皱折及碎裂。又因OCT混合物为水溶性,故在漂片时可溶于水,所以在以后的染色中不会增加背景染色。 利用OCT混合物(optimal cutting temperature compound)预先浸润组织,然后再进行恒冷箱切片,使切片质量得到改善。

包埋剂的分类
一般用光学显微镜观察的切片,用石蜡、火棉胶、碳蜡、明胶等作包埋剂;
电子显微镜则使用环氧杯脂、聚苯乙/烯树脂、异丁/烯树脂及水溶性树脂;
硬组织包埋(骨、牙齿)则采用塑料包埋,甲酯甲基内/烯。
实际上包埋剂就是浸诱剂,浸透和包埋时用的是同一种物质,只是用在不同的步骤上叫法不同而已。如用石蜡作浸透,那么同样要用同样的石蜡包埋。

如何选择合适的包埋剂
包埋剂的作用组织对象有特定需求,选择合适包埋剂可以提高包埋质量,从而提高切片质量。接下来,为大家简单做了分类:
石蜡:最常用常见的包埋剂,是病理制片最经典的包埋剂,简便易掌握,经济又安全。
碳蜡:一种急用型包埋剂,制片时间短,不经过脱水与透明处理,组织块收缩较小,一般3小时即可制成蜡块;但吸水性强,摊片及蜡块保存难度相对偏大。主要用于脂肪及类脂的组织制片。
火棉胶:主要用于大块组织(直径在3~10cm的软组织、器官、脱钙后的大块骨组织及整个股骨头和眼球等),可避免纤维组织的收缩和肌肉组织的过度硬化,有利于保持组织的原有结构。但操作过程较久,临床和尸检制片很少用,但对研究神经组织、骨组织和眼球有一定帮助。
明胶:在病理制片中使用少,主要用于一些动物实验标本。
树脂:主要用于电子显微镜的制片,种类有:环氧树脂、聚苯乙/烯树脂、异丁/烯树脂及水溶性树脂,使用方法差不多。但一些硬度较大的可能需要使用钨钢刀和钨钢刀架,如环氧树脂。
塑料:主要用于硬组织如:不脱钙骨组织、牙齿等。
OCT冰冻切片包埋剂是一种polyethylene glycol和Polyvinyl alcohol的水溶性混合物,目前已广泛用于免疫组化实验室中,其用途是在冰冻切片时支撑组织,以增加组织的连续性,减少皱折及碎裂。又因OCT包埋液为水溶性,故在漂片时可溶于水,所以在以后的染色中不会增加背景染色。
利用OCT胶(Opti-mum Cutting Temperature Compound)预先浸润组织,然后再进行恒冷箱切片,使切片质量得到改善。建议配套使用樱花OCT冰冻切片包埋模具。
OCT包埋剂(SAKURA产品)包埋流程:
1.将放在蔗糖溶液中的组织块取出,放入20g L-1 蔗糖与OCT包埋剂1:1体积比例混合液中,室温浸泡2h.
2.移入OCT包埋剂中室温浸泡4h,更换新的OCT包埋剂,室温浸泡6h.
3.将标本置于托物台,用恒冷箱切片机切片(一般-22℃),片厚10μm,贴于预处理的载玻片上,-20℃冰箱保存 。

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