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发布日期:2024/12/23 11:48:00
细胞进行培养后,需要对其生长情况、形态甚至生物学性状进行观察。由于细胞小而复杂,若不借助适当的手段,难以观察其形态、结构,更难发现细胞内各种组分的分子组成及功能。目前,已有多种研究细胞的技术,从光学显微镜到电子显微镜,从一般细胞化学法到免疫化学法。细胞染色是研究细胞生物学特征的一种常用手段,然而,对于细胞实验新手来说,想要获得一张漂亮的细胞染色图并不容易。染色试剂不会选、细胞染色不均匀、染色时切片脱落等都是很常见的问题。今天源叶小编就为大家整理了几种常用细胞染色方法及染色剂选择指南,快来学习!

细胞染色是生物学研究中常用的技术,它涉及到使用特定的染料或荧光探针来观察和分析细胞的结构和功能。以下是一些常见的细胞染色方法和染料:

 

瑞氏染色(Wright's stain)

染液主要由碱性染料亚甲蓝(美蓝)和酸性染料伊red溶于甲醇配置形成。操作简单,染色时间短,对细胞质成分及中性颗粒染色效果较好。染色效果较差,容易退色,对细胞核染色效果较姬姆萨染色法差。保存时间短,适用于临时性检验,如血涂片血细胞分析。

姬姆萨染色(Giemsa's stain)

染液主要由碱性染料天青色素、酸性染料伊red、甘油和甲醇配制而成。染色效果好,对细胞核和寄生虫等效果较好,染色后保存时间长退色缓慢。染色时间较长,成本比较高,对细胞质成分及中性颗粒染色效果较差。适用于寄生虫检测或需要长期保存的标本涂片。

瑞-姬氏染色(Wright- Giemsa's stain)

为复合染色法,结合了瑞氏染色和姬姆萨染色的优点。染色时间短,染色效果好,成本比姬姆萨染色法低。不易退色,适用于临时性寄生虫或血涂片等检查。 

巴氏染色(Papanicolaou stain)

染液主要由苏木素、橘黄G6(含橘黄G、磷钨酸等)、蓝化液、EA50(含淡绿、伊red、乙酸、磷钨酸等)或EA36(含淡绿、伊red、磷钨酸等)组成。染色效果好,细胞着色鲜艳多彩、透明度好、胞质颗粒和胞核结构清晰。染色时间长(>1h),染色步骤多且复杂。适用于脱落细胞学检查、上皮细胞或肿瘤细胞检查。

苏Wood Essence-伊red染色(Hematoxylin-eosin staining)

染液主要由碱性染料苏Wood Essence和酸性染料伊red组成。染色效果稳定,透明度好,层次清晰,细胞核和细胞质对比鲜明。不能显示胞质分化程度,细胞核极易过染,染色时间较长(30-40min)。适用于组织病理学检查、痰液涂片检查等。

免疫组化染色(Immunohistochemical staining)

利用抗原抗体之间的特异性结合,用于研究细胞产物如分子、蛋白质或糖蛋白的表达、定位、分布和迁移等。

荧光染色

使用荧光染料如Hoechst33258和Hoechst33342等,可以穿过活细胞膜与细胞核结合,在紫外光下将核染为蓝色。

用于细胞核染色,可以区分活死细胞,但需要注意染色后尽快检测,以避免荧光淬灭。

染色方法的选择

在选择染色方法时,需要考虑染色的目的、样本的类型、所需的染色效果等因素。例如,瑞氏染色和姬姆萨染色常用于血细胞的染色,而巴氏染色则常用于脱落细胞学检查。荧光染色如Hoechst染色,常用于细胞核染色和细胞凋亡检测.

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