常规储存
首先,刚到货的血清,趁着它还冻手,赶紧放进-20℃冰箱中,避免反复冻融。当然,如果你的课题组不差钱,-80℃冰箱空间充足,把血清储存进去也是没有问题的。
如何解冻
放4℃过夜
直接在4℃冰箱里过夜融化的方法,虽然很多人在这么用,但还是有一些潜在的风险的。
我们都知道,在血清这种混合物中,融化速度:蛋白质等干物质>水这类溶剂,所以蛋白质会率先溶解析出,而水还是结成冰的状态,导致瓶子中间会出现一根透明的冰柱,而周围则会呈现上黄下红的分层浑浊液的状态,在使用过程中很容易引起沉淀、混合不均匀、局部浓度过高等问题,影响细胞生长。
更重要的一点是,血清中珍贵的生长因子等活性物质,它们在解冻过程中,有着与细胞复苏类似的经历,都需要快速解冻才能保留生物活性。显然,4℃过夜这样的长时间处理,很有可能会导致一部分「营养成分」的损失,影响细胞生长。
4℃存放时间
一般情况下,已经解冻的血清,无论是配成完全培养基还是在冰箱里备用,都不要超过一周(7天),原因也很简单,存放太久,生长因子等物质容易失活,而且比较容易受到污染,影响实验结果。