Amicon^®超滤装置

浓缩蛋白质，不造成任何损失使用Amicon^® Ultra过滤器进行浓缩，能可靠回收蛋白质。Amicon^® 超滤装置可快速、可靠地浓缩蛋白质和生物分子，根据分子量分离分离生物和环境样品中的组分，脱盐和透析蛋白质和抗体，从而进行样品制备。Amicon^® Ultra超滤装置采用低结合性的Ultracel^® 再生纤维素滤膜，确保更为精准的截留分子量和更高的蛋白回收率。

如何选择Amicon^® Ultra过滤器

1. 确定样品的起始体积 
2. 确定您期望的大分子的分子量（MW），并选择截留分子量（MWCO）比MW小2-3倍的超滤膜。
3. 选择包装尺寸 

Amicon^®Ultra离心式过滤装置

Amicon^® Ultra离心过滤器具有快速超过滤功能，且从稀释液和复杂的样本组合中能达到较高的浓缩系数。其竖式设计以及可用的滤膜表面积使其能进行快速的样本处理，拥有较高的样本回收率，且拥有高达80倍浓缩系数的浓缩能力。  

使用注意事项

（1）选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。

（2）新买来的超滤是干燥的，使用前加入超纯水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。

（3）平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心机预冷至4度）。不同离心机的转速 rpm换算成g之后，有所不同。离心机的加速度调至最低档，减小对膜的压力。注意，一定要等离心机达到目的转速之后，方可离开离心机，否则离心机出问题时，无法第一时间处理。膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。

（4）当浓缩到剩下1ml时，取50ul缓冲溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管，用5mgml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的缓冲溶液，直到蛋白不发生沉淀为止。

（5）前面几步用以浓缩蛋白，如果要换Buffer，在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候，轻轻加入新的Buffer（经0.22um超滤膜超滤），再 浓缩至1ml左右，连续三次，最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定，一般不多于500ul，也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算，三次达到1000倍以上，基本上可以达到换buffer的目的。

产品特点

• 高回收率（90-98%）: Ultracel^®再生纤维素滤膜有一系列不同的截留分子量 
• 快速处理时间: 竖式滤膜能减小浓差极化和薄膜积垢，在短短10-15分钟内进行超滤快速离心。
• 低非特异性结合: 热封的滤膜能最/大/程度降低下游抽提物 
• 便捷的样品监控: 透明外壳和渐变的体积
• 直接移液管取样 取消了回收浓缩液的处理步骤 
• 反向离心能力可提供一致的最高蛋白质回收率，即使对少量稀释样品也是如此
• 低样品损失: 过滤装置中内含物理止动设计，可防止过度离心导致的样品干涸以及可能的样品损失 
• 广泛的化学兼容性：兼容pH 1至9的多种水溶液
• 一致且可靠的样品制备：可预知浓缩系数，不必干燥样品 
• 快速蛋白质浓缩：一步即可浓缩25至80倍

Amicon^®Ultra离心式过滤装置在4种不同体积中提供3 kDa、10 kDa、30 kDa、50 kDa和100 kDa标称分子量限值(NMWL)选择。 

• Amicon^® Ultra 0.5 mL离心过滤器
• Amicon^® Ultra 2 mL离心过滤器 
• Amicon^® Ultra 4 mL离心过滤器
• Amicon^®Ultra 15 mL离心过滤器 

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