SDS-PAGE Gel Preparation Kit
SDS-PAGE凝胶配制试剂盒
产品简介:
本公司提供的SDS-PAGE凝胶快速制备试剂盒包含凝胶制备所需的全部试剂。本试剂盒可配制至少50块常规大小的PAGE胶。
产品组分:
货号 |
名称 |
规格 |
保存条件 |
DA8461-1 |
30%Acr-Bis(29:1) |
100 ml |
4℃ |
DA8461-2 |
1M Tris-HCLpH8.8 |
100 ml |
RT |
DA8461-3 |
1M Tris-HCLpH6.8 |
15 ml |
RT |
DA8461-4 |
10% SDS |
5 ml |
RT |
DA8461-5 |
APS(于粉) |
0.5g |
RT,配制后-20℃ |
DA8461-6 |
TEMED |
0.5ml |
4℃,避光 |
|
说明书 |
一份 |
|
使用说明:
一、配制分离胶(各试剂使用量请参考表二)
根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度(表一),再按照下面的分离胶配方表(表二)配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)。
表一不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围:
SDS-PAGE分离胶浓度 |
最佳分离范围 |
6% |
50-150kD |
8% |
30-90kD |
10% |
20-80kD |
12% |
12-60kD |
15% |
10-40kD |
配制分离胶前,根据以下配方准备10%APS;
10%APS配制(5ml);将0.5gAPS干粉溶于5ml灭菌水中,彻底溶解后分装,1 ml支,-20℃备存,每次取一管使用,10%APS应尽量减少室温存放时间,以防失效,
10%APS在4℃有效期为一用, -20℃有效期6个月,若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换使用-20度保存的10%APS,
制备分高胶步骤;
1、 参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
2、 按照表二将不同体积的成分在小烧杯或试管中混合;加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌 使其沉匀,避免产生气泡,
3、在凝胶模具中滥入适量分离胶溶液(对于mini-gcl,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm 成距梳齿约0.5 cm即可),然后在分离胶溶液上轻轻覆益一层1-5 cm的水层,使凝胶表面保 持平整、
4、 静置15-20分钟,待分离胶和水层之间出现一个清听的界面后,说明凝胶已聚合。
表二SDS-PAGE分离胶配方表
组分 |
不同凝胶体积对应各组份的取样量(ml) |
|||
6%胶 |
5ml |
10ml |
15ml |
20ml |
H₂O |
2.05 |
4.1 |
6.15 |
8.2 |
1M Tris-HCLpH8.8 |
1.9 |
3.8 |
5.7 |
7.6 |
30% Acr-Bis(29:1) |
1 |
2 |
3 |
4 |
10% SDS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
TEMED |
0.005 |
0.01 |
0.015 |
0.02 |
10% APS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
8%胶 |
5ml |
10ml |
15ml |
20ml |
H₂O |
1.7 |
3.3 |
5 |
6.7 |
1M Tris-HCLpH8.8 |
1.9 |
3.8 |
5.7 |
7.6 |
30% Acr-Bis(29:1) |
1.3 |
2.7 |
4 |
5.3 |
10% SDS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
TEMED |
0.005 |
0.01 |
0.015 |
0.02 |
10% APS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
10%胶 |
5ml |
10ml |
15ml |
20ml |
H₂O |
1.3 |
2.7 |
4 |
5.3 |
1M Tris-HCLpH8.8 |
1.9 |
3.8 |
5.7 |
7.6 |
30% Acr-Bis(29:1) |
1.7 |
3.3 |
5 |
6.7 |
10% SDS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
TEMED |
0.005 |
0.01 |
0.015 |
0.02 |
10% APS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
12%胶 |
5ml |
10ml |
15ml |
20ml |
H₂O |
1 |
2 |
3 |
4 |
1M Tris-HCLpH8.8 |
1.9 |
3.8 |
5.7 |
7.6 |
30% Acr-Bis(29:1) |
2 |
4 |
6 |
8 |
10% SDS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
TEMED |
0.003 |
0.006 |
0.009 |
0.012 |
10% APS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
15%胶 |
5ml |
10ml |
15ml |
20ml |
H₂O |
0.5 |
1 |
1.5 |
2 |
1M Tris-HCLpH8.8 |
1.9 |
3.8 |
5.7 |
7.6 |
30% Acr-Bis(29:1) |
2.5 |
5 |
7.5 |
10 |
10% SDS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
TEMED |
0.003 |
0.006 |
0.009 |
0.012 |
10% APS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
二、浓 缩 胶 制 备:
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、按照表三将不同体积成分在一个小烧杯或试管中混合;加入10%APS和TEMED,轻轻授 拌使其混匀,避免产生气泡。
3、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
4、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
5、静置30-40分钟,等待浓缩胶聚合。
表三SDS-PAGE浓缩胶(4%)配方表
组份 |
不同凝胶体积对应各组份的取样量(ml) |
|||
2ml |
4ml |
5ml |
10ml |
|
H₂O |
1.4 |
2.7 |
4.1 |
6.8 |
1MTris-HCLpH6.8 |
0.25 |
0.5 |
0.75 |
1.25 |
30% Acr-Bis(29:1) |
0.33 |
0.67 |
1 |
1.7 |
10% SDS |
0.02 |
0.04 |
0.06 |
0.1 |
TEMED |
0.002 |
0.004 |
0.006 |
0.01 |
10% APS |
0.02 |
0.04 |
0.05 |
0.1 |
注意事项:
1、凝胶的聚合时间与环境温度有关。夏天温度较高时,聚合较快;冬天气温低时,聚合 时间会延长。可以根据环境温度的不同调节APS的加入量。
2、本产品仅限于专业人员科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
3、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
按照标签所示保存,有效期一年;常温运输。
产品编号 |
名称 |
包装 |
品牌 |
P0012A |
1盒 |
碧云天 |
|
O0600 |
50T |
麦格 |
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