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发布日期:2024/4/15 9:52:00

SDS-PAGE Gel Preparation Kit

SDS-PAGE凝胶配制试剂盒

产品简介:

本公司提供的SDS-PAGE凝胶快速制备试剂盒包含凝胶制备所需的全部试剂。本试剂盒可配制至少50块常规大小的PAGE胶。

产品组分:

货号

名称

规格

保存条件

DA8461-1

30%Acr-Bis(29:1)

100 ml

4℃

DA8461-2

1M Tris-HCLpH8.8

100 ml

RT

DA8461-3

1M Tris-HCLpH6.8

15 ml

RT

DA8461-4

10% SDS

5 ml

RT

DA8461-5

APS(于粉)

0.5g

RT,配制后-20℃

DA8461-6

TEMED

0.5ml

4℃,避光

 

说明书

一份

 

使用说明:

一、配制分离胶(各试剂使用量请参考表二)

根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度(表一),再按照下面的分离胶配方表(表二)配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)。

表一不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围:

 

SDS-PAGE分离胶浓度

最佳分离范围

6%

50-150kD

8%

30-90kD

10%

20-80kD

12%

12-60kD

15%

10-40kD

配制分离胶前,根据以下配方准备10%APS;

10%APS配制(5ml);将0.5gAPS干粉溶于5ml灭菌水中,彻底溶解后分装,1 ml支,-20℃备存,每次取一管使用,10%APS应尽量减少室温存放时间,以防失效,

10%APS在4℃有效期为一用, -20℃有效期6个月,若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换使用-20度保存的10%APS,

制备分高胶步骤;

1、 参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。

2、 按照表二将不同体积的成分在小烧杯或试管中混合;加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌 使其沉匀,避免产生气泡,

3、在凝胶模具中滥入适量分离胶溶液(对于mini-gcl,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm 成距梳齿约0.5 cm即可),然后在分离胶溶液上轻轻覆益一层1-5 cm的水层,使凝胶表面保 持平整、

4、 静置15-20分钟,待分离胶和水层之间出现一个清听的界面后,说明凝胶已聚合。

 

表二SDS-PAGE分离胶配方表

 

组分

不同凝胶体积对应各组份的取样量(ml)

6%胶

5ml

10ml

15ml

20ml

H₂O

2.05

4.1

6.15

8.2

1M Tris-HCLpH8.8

1.9

3.8

5.7

7.6

30% Acr-Bis(29:1)

1

2

3

4

10% SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

TEMED

0.005

0.01

0.015

0.02

10% APS

0.05

0.1

0.15

0.2

8%胶

5ml

10ml

15ml

20ml

H₂O

1.7

3.3

5

6.7

1M Tris-HCLpH8.8

1.9

3.8

5.7

7.6

30% Acr-Bis(29:1)

1.3

2.7

4

5.3

10% SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

TEMED

0.005

0.01

0.015

0.02

10% APS

0.05

0.1

0.15

0.2

10%胶

5ml

10ml

15ml

20ml

H₂O

1.3

2.7

4

5.3

1M Tris-HCLpH8.8

1.9

3.8

5.7

7.6

30% Acr-Bis(29:1)

1.7

3.3

5

6.7

10% SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

 

TEMED

0.005

0.01

0.015

0.02

10% APS

0.05

0.1

0.15

0.2

12%胶

5ml

10ml

15ml

20ml

H₂O

1

2

3

4

1M Tris-HCLpH8.8

1.9

3.8

5.7

7.6

30% Acr-Bis(29:1)

2

4

6

8

10% SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

TEMED

0.003

0.006

0.009

0.012

10% APS

0.05

0.1

0.15

0.2

15%胶

5ml

10ml

15ml

20ml

H₂O

0.5

1

1.5

2

1M Tris-HCLpH8.8

1.9

3.8

5.7

7.6

30% Acr-Bis(29:1)

2.5

5

7.5

10

10% SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

TEMED

0.003

0.006

0.009

0.012

10% APS

0.05

0.1

0.15

0.2

二、浓    备:

1、去除覆盖在分离胶上的水层。

2、按照表三将不同体积成分在一个小烧杯或试管中混合;加入10%APS和TEMED,轻轻授 拌使其混匀,避免产生气泡。

3、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。

4、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。

5、静置30-40分钟,等待浓缩胶聚合。

表三SDS-PAGE浓缩胶(4%)配方表

 

组份

不同凝胶体积对应各组份的取样量(ml)

2ml

4ml

5ml

10ml

H₂O

1.4

2.7

4.1

6.8

1MTris-HCLpH6.8

0.25

0.5

0.75

1.25

30% Acr-Bis(29:1)

0.33

0.67

1

1.7

10% SDS

0.02

0.04

0.06

0.1

TEMED

0.002

0.004

0.006

0.01

10% APS

0.02

0.04

0.05

0.1

 

注意事项:

1、凝胶的聚合时间与环境温度有关。夏天温度较高时,聚合较快;冬天气温低时,聚合 时间会延长。可以根据环境温度的不同调节APS的加入量。

2、本产品仅限于专业人员科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。

3、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件:

按照标签所示保存,有效期一年;常温运输。

产品编号

名称

包装

品牌

P0012A

SDS-PAGE凝胶配制试剂盒

1盒

碧云天

O0600

SDS-PAGE凝胶配制试剂盒

50T

麦格

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